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一、测序策略：
链特异性转录组测序（strand-specific RNA sequencing）是指在构建测序文库时，利用Illumina高保真Taq酶将mRNA链的方向信息保存到测序文库中。测序后的数据分析可确定转录本是来自正义还是反义DNA链。与普通转录组测序相比，它更能准确地统计转录本的数量和确定基因的结构，同时可以发现更多的反义转录本，目前被广泛地应用于研究基因结构和基因表达调控等领域范围。
建库测序流程如下：
1.1 总RNA样品检测：检测RNA样品的纯度、浓度和完整性；
1.2 文库构建：RNA样品检测合格后，去除rRNA，将mRNA随机打断成段片段，通过逆转录合成双链cDNA并纯化。纯化的双链cDNA先进行末端修复、加A尾并连接测序接头，进行片段大小选择。最后进行PCR扩增，纯化PCR产物，得到文库；
1.3 文库质检：文库构建完成后，先检测文库的插入片段长度，对文库的浓度进行精确定量；
1.4 上机测序：文库质检合格后，进行上机测序。
二、样本要求：
2.1 RNA样品要求（请使用干冰运送）：
2.1.1 浓度≥40 ng/μl，总量≥2 μg的RNA；
2.1.2 OD260/280≥1.8，OD260/230≥1.8，RIN≥7.0，23S:16S≥1.0，RNA无降解无污染，基线平整，5S峰正常。
2.2 菌体样本（请使用干冰运送）：
菌体：≥106 个或200 mg。
